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别只关注台盼蓝,南宫28NG相信品牌力量,五种方法精准测量细胞活率!

发布时间:2025-03-23   信息来源:匡博玲

在生物医疗领域,细胞活率的鉴定是一个至关重要的环节。这一过程无论在细胞培养、药物筛选,还是细胞治疗产品的质量控制中,都对实验的成功至关重要。提到细胞活率检测,许多人首先会想到经典的台盼蓝染色法。该方法因其操作简单且成本低廉,成为实验室的“标配”。

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然而,台盼蓝染色法并非完美无缺。它只能反映细胞膜的完整性,而无法评估细胞的代谢状态。此外,台盼蓝对细胞有一定毒性,长时间染色可能会影响细胞活性,并且在操作时也可能出现误差。那么,除了台盼蓝,还有哪些方法可以更全面、更精准地评估细胞活率呢?

1. CCK-8法

CCK-8试剂中含有WST–8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),这种淡黄色水溶性染料能够被活细胞的线粒体脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲臜产物。通过测定这一产物的吸光度,可以间接反映细胞的活性和增殖能力。

优点:灵敏度高,适合高通量筛选;能够反映细胞的代谢活性,而不仅仅是膜的完整性。

不足:需要特定仪器(如酶标仪)来测定吸光度,实验步骤较多,耗时相对较长(15小时-4小时)。

2. 荧光染料法

这种方法使用荧光染料(如PI碘化丙啶、Calcein-AM)标记细胞。PI仅能进入死细胞,与DNA结合后发出红色荧光;而Calcein-AM在活细胞中代谢后发出绿色荧光。利用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,可以有效区分活细胞和死细胞。

优点:灵敏度高,结果准确;可以结合流式细胞仪进行高通量分析,适合于复杂样本的检测。

不足:需要昂贵的仪器,且荧光染料可能对细胞有一定毒性,操作相对复杂。

3. ATP测定法

ATP是细胞能量的直接来源,活细胞中ATP含量较高,而死细胞中ATP含量极低。因此,通过检测细胞中ATP的含量,可以间接反映细胞活率。

优点:灵敏度极高,可以检测微量细胞;结果快速,适合高通量筛选,也能反映细胞的代谢状态。

不足:需要特定的试剂盒和仪器(如化学发光仪),成本较高,不适合大规模使用。

4. 克隆形成实验

克隆形成实验用于评估细胞的增殖能力、侵袭性及对杀伤因素的敏感性。该实验中,细胞克隆形成率即为细胞接种后的存活率,是衡量接种细胞成活并形成克隆数量的重要指标。当单个细胞在体外增殖超过6代时,形成的细胞群体被称为克隆或集落。使用平板克隆形成试验和软琼脂克隆形成试验,可以定量分析单个细胞的增殖潜力。

优点:反映细胞群体的依赖性及其增殖能力,常用于抗肿瘤药物敏感性试验及放射生物学试验。

在生物医疗研究中,细胞活率的鉴定是基础环节,而选择合适的方法也尤为重要。每种方法都有其独特的优势与局限性,应根据实验需求、设备条件和样本特性灵活选择。选择南宫28NG,您将体验到在细胞活率检测领域的领先技术与卓越品质,相信品牌力量,选择南宫28NG,让您的研究更精准、高效。