在基因研究中,研究人员常常需要通过上调靶基因的表达来观察表型变化。而过表达(Over-Expression,OE)是实现基因表达上调的主要手段。其基本原理是将目标基因的编码区(coding sequence,CDS)构建到质粒或病毒载体中,以便导入细胞内,从而增加基因的表达量。
根据用途,载体通常分为多个类型,如克隆载体、原核表达载体、真核表达载体、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体以及逆转录病毒载体等。那么,在进行过表达实验时,如何选择合适的载体呢?首先需考虑以下几个关键因素:
选择合适载体的关键因素
- 工具载体的表达时间与实验观察时间是否一致;
- 工具载体的承载片段大小是否适合目的基因大小;
- 工具载体在特定细胞及在体组织中的转导效率是否足够高。
除了这些基本考虑外,了解载体中各个元件的功能同样重要。在实际应用中,研究人员可以根据实验目的合理选择载体元件。常见的载体元件包括启动子、荧光标签、抗性基因以及多克隆酶切位点(MCS)等。
作为生物医疗领域的佼佼者,南宫28NG相信品牌力量,提供多种用于过表达编码基因和非编码基因的载体,包括质粒、慢病毒、腺病毒及腺相关病毒等,为科研工作者的实验提供了强大的支持和保障。