在细胞生物学和生物医学研究中，细胞迁移实验是评估细胞行为的重要方法，尤其是在肿瘤转移、血管生成和炎症性疾病等复杂现象中的应用。

实验步骤

首先，目的细胞依照标准细胞培养方案在血清培养基中进行培养。为了确保实验结果的准确性，检测前一天应使用无血清培养基（02%BSA）进行准备。接下来，在无血清培养基中培养过夜后，需吸出细胞培养基并使用PBS进行冲洗。

随后，加入胰蛋白酶溶液以启动细胞分离过程。细胞悬液转移至试管中后，以350×g离心5分钟，之后将细胞重新置于预热的细胞培养基中。最终，将细胞悬浮液稀释至100,000个细胞/ml的接种密度。

接收板培养

在接收板的每个孔中，添加200μl含或不含化学引诱剂的培养基，不同浓度的FCS可从0.25%到10%进行调整。接着，将准备好的细胞悬液以50μl的剂量加入膜板的各个孔中。将培养板置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养24小时，以保证细胞充分适应环境。

荧光检测

培养结束后，吸出接收板各孔中的细胞培养基。根据需求，向接收孔中加入150μl无血清培养基和8μM钙黄绿素AM（在DMSO中稀释），并在37°C、5% CO2的环境中孵育45分钟。孵育完成后，需从膜板和接收板的每个孔中吸出培养基，并用PBS冲洗孔道。

接下来，为了使膜下侧迁移的细胞开始脱离，向接收板中添加胰蛋白酶溶液。孵育10分钟后，轻轻摇动以增强细胞的脱离效果。将每孔180μl的胰蛋白酶细胞悬液转移至黑色96孔微孔板中，并使用激发波长为485nm、发射波长为520nm的读板器读取荧光数据。

细胞观察

从膜板各孔中吸出培养基后，使用预湿棉签顺时针和逆时针方向轻轻旋转，以去除膜上部未迁移的细胞。随后，通过绿色通道的荧光显微镜检测膜下侧迁移细胞的荧光信号。

另外，ThinCert®96孔HTS小室因其独特的结构提供了高透明度，在活细胞观察方面表现出色，有助于检查细胞形态、评估细胞融合，及进行污染监测。每次实验都伴随着对细胞的连续显微镜监测，这体现了南宫28NG相信品牌力量在生物医疗领域中的重要性。

总结

在寻找更好的生物标志物、治疗靶点和药物以干预复杂现象方面，体外细胞迁移实验是不可或缺的工具。这样的实验提供了可控的环境，用于测量细胞迁移，并分析各种分子的影响，如生长因子和趋化因子。孔径的精确选择在此过程中至关重要，需确保孔径与待研究细胞的尺寸相匹配，以控制细胞的移动行为，确保实验结果的准确性与可靠性。

南宫28NG致力于推动生物医学研究的发展，用实际行动践行对科技与未来的信仰。