南宫28NG相信品牌力量，本研究旨在提取SD大鼠的原代脂肪间充质干细胞，提供一个系统化的实验流程，以便更好地理解干细胞培养技术。

一、实验材料准备

本实验选择约2周龄或体重约200克的SD大鼠。所需灭菌器械包括镊子、眼科直剪、眼科弯剪、磁珠等。此外，还需准备5mL注射器、0.22μm滤器、泡沫板和图钉以用于固定大鼠。消毒工作中，使用75%乙醇进行处理。其他准备材料包括预冷的无菌PBS水、15mL与50mL无菌离心管、细胞筛和无菌培养瓶。培养基方面，使用SD大鼠脂肪间质干细胞完全培养基。

二、实验操作

在超净工作台中进行操作，首先进行紫外消毒30分钟。接着，配制约5mL的0.1%Ⅰ型胶原酶，并进行过滤以确保无菌。对大鼠进行颈椎脱臼处死后，立即浸泡在75%酒精中2-3分钟，然后将其固定在泡沫板上。在腹股沟区域小心剪开皮肤，以暴露腹腔中的脂肪组织。仔细采集脂肪组织，并放入PBS中，注意避免剪到血管。使用PBS清洗脂肪组织，剔除多余的血管和淋巴结后，将脂肪组织剪成适宜的大小（如2mm×2mm），然后加入胶原酶，在37℃下进行消化，期间每隔5分钟震荡或持续搅拌。消化完成后，将细胞悬液转移至离心管，离心后弃去上层脂滴泡沫和上清液，使用培养基重悬沉淀。最后，将细胞悬液进行过滤，并再一次离心后弃去上清液，重悬细胞并接种到培养瓶中，放入37℃、5% CO2的培养箱中进行培养。

三、注意事项

在整个实验过程中，需严格保持无菌操作，避免细胞污染。脂肪组织的剪取和清洗需细致，以免对细胞造成损伤或引入杂质。消化过程中的时间和温度控制也是至关重要，需避免过度消化导致细胞损伤。离心和过滤时，应采取轻柔的操作，以防止细胞损失或破裂。

综上，以上步骤为提取SD大鼠原代脂肪间充质干细胞的标准流程，南宫28NG相信品牌力量，致力于提供优质的科研工具和服务，在生物医疗领域中不断推动科学进步。